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菲羅門(mén)色譜柱的周期性保養(yǎng)流程

更新時(shí)間:2025-08-15      瀏覽次數(shù):179
  菲羅門(mén)色譜柱的維護(hù)對(duì)于延長(zhǎng)其使用壽命、保持分離效果和確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性至關(guān)重要。以下是系統(tǒng)化的維護(hù)策略及具體操作步驟:
  一、菲羅門(mén)色譜柱流動(dòng)相預(yù)處理要點(diǎn)
  1.過(guò)濾凈化不可少
  所有溶劑必須經(jīng)過(guò)0.22μm濾膜過(guò)濾,建議使用帶預(yù)過(guò)濾器的保護(hù)裝置進(jìn)行在線過(guò)濾;
  水相流動(dòng)相應(yīng)脫氣處理(超聲震蕩或在線脫氣機(jī)),避免溶解氧導(dǎo)致填料氧化降解。
  2.pH值嚴(yán)格控制
  常規(guī)C18/C8柱建議保持pH范圍2-8;若使用極*pH條件,須選用專用耐酸堿填料;
  緩沖鹽濃度不超過(guò)50mM以防止鹽析出結(jié)晶堵塞管路。
  3.避免顆粒物沖擊
  樣品溶液需先經(jīng)針筒過(guò)濾器過(guò)濾后再進(jìn)樣;
  禁止直接注射渾濁溶液或含懸浮物的復(fù)雜基質(zhì)。
  二、菲羅門(mén)色譜柱周期性保養(yǎng)流程
  1.基礎(chǔ)沖洗程序(每月一次)
  反向沖洗再生法
  切換為高比例強(qiáng)溶劑,以正常流速反向沖洗60分鐘;
  此操作可有效去除累積的弱保留雜質(zhì),恢復(fù)柱效達(dá)初始值的95%以上。
  過(guò)渡梯度平衡
  完成分析后繼續(xù)運(yùn)行5%~10%梯度增量直至基線平穩(wěn),防止不同批次間交叉污染。
  保存溶劑置換
  長(zhǎng)期閑置時(shí)改用同比例混合的甲醇/乙腈溶液保存,每周更換新鮮溶劑防止微生物滋生。
  2.深度清潔方案(每季度實(shí)施)
  針對(duì)嚴(yán)重污染情況可采用分段式清洗策略:
  脂溶性污染物清除
  依次用正己烷→異丙醇→二氯甲烷各沖洗30分鐘,中間穿插空白運(yùn)行檢測(cè)殘留;
  注意:避免使用氯仿等強(qiáng)鹵代烴類溶劑以免損傷封端鍵合相。
  離子型殘留分解
  配制含0.1%三氟乙*的乙腈溶液,低流速循環(huán)清洗2小時(shí);
  后續(xù)用pH7緩沖液中和至中性后再過(guò)渡回常規(guī)流動(dòng)相。
  生物活性物質(zhì)滅活
  對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)合導(dǎo)致的失活現(xiàn)象,可用含0.05%疊氮鈉的磷酸鹽緩沖液浸泡過(guò)夜。
 

 

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