選購菲羅門色譜柱時,需結合分析需求、樣品性質(zhì)及儀器條件進行綜合評估。以下是關鍵要求和注意事項:
一、明確分離目標與應用場景
1.化合物類型
根據(jù)目標物的極性(非極性/弱保留→正相;強極性→反相)、分子量大小、離子狀態(tài)。
2.模式匹配
HPLC常規(guī)分析選傳統(tǒng)顆粒;UHPLC超高效液相需亞2μm粒徑柱;制備純化則考慮高載樣量的Prep柱型號。
1.極*pH穩(wěn)定性
選用pH范圍擴展型產(chǎn)品,適用于離子化化合物的梯度洗脫。
2.高溫耐受需求
某些聚合物基質(zhì)柱支持80℃恒溫運行,加速熱不穩(wěn)定雜質(zhì)的洗脫。
3.化學反應兼容性
含氯溶劑體系避免使用含苯基團填料防止溶脹變形。
三、菲羅門色譜柱系統(tǒng)適配性驗證要點
1.接口匹配度檢查
確認柱接頭與現(xiàn)有設備的管路內(nèi)徑一致,避免死體積過大導致峰展寬。
2.最大操作壓力測試
在儀器最高泵壓下運行空白梯度,監(jiān)測柱壓降是否超過廠家規(guī)定的ΔP_max值。
3.溶劑兼容性排查表
查閱技術手冊中禁止使用的強腐蝕性試劑清單(如濃硫酸可能損壞封邊樹脂)。
四、菲羅門色譜柱性能驗證標準化流程
1、 理論塔板數(shù)測定
用萘等標準品在優(yōu)化流速下進樣,計算N≥預期的理論值。
2、 拖尾因子評估
堿性化合物在未封尾柱上的TF常>1.5,此時應切換至端基封堵型產(chǎn)品。
3、 重復進樣RSD控制
同一濃度連續(xù)6針的主峰面積RSD應<0.5%,反映批次間重現(xiàn)性水平。
